안녕하세요
아제라바이오텍 이경희 입니다.
TLC, HPLC 시험 관련해서 문의드리고자 합니다.
1. 식물 추출물(액상)의 HPLC 시험을 진행 문의드립니다.
아래와 같은 조건으로 진행이 가능할까요? 가능하다면, 견적 문의드립니다.
[HPLC 분석조건]
• Instrument: Agilent 1260 Infinity
• Column: Symmetry 4.6mm X 250mm, 5um
• Temp : 35℃
• Mobile phase: ACN/MeOH/Water (30:40:30)
• Flow rate: 1.0mL/min
• Injection Volume: 5uL
• Detector: 230nm
시료조제
• 표준품으로 Precocene-II (trc canada, 98%) 1.69mg을 e-tube에 정밀하게 달고 여기에 MeOH 1.69mL을 넣고 용해 (1mg/mL)
• 불로화 EtOH 추출물 1, 2, 3 시료를 각각 50g씩 취해 45℃ 수욕조에서 회전감압농축기로 증발건조
• 위의 과정을 2회 반복하여 9개의 시료 확보
• 각 시료 1g을 100mL volumetric flask에 정확히 달아 MeOH로 녹인 후, 표선까지 MeOH을 채움
• 각 시료들을 잘 흔들어 완전히 녹임
• 12,000 rpm에서 10분간 원심분리
• 상등액을 0.45um membrane filter로 여과하여 HPLC 시료로 사용 (10mg/mL)
2. 식물 추출물을 포함하고 있는, 화장품(크림제제)의 HPLC 시험도 문의 드립니다.
[HPLC 분석조건]
• Instrument: Agilent 1260 Infinity
• Column: Symmetry 4.6mm X 250mm, 5um
• Temp : 35℃
• Mobile phase: ACN/MeOH/Water (30:40:30)
• Flow rate: 1.0mL/min
• Injection Volume: 5uL
• Detector: 230nm
시료조제
• 추출물크림 20g을 취해 물 150mL로 섞고 separatory funnel로 옮긴 후 n-hexane 150mL을 넣고 30분간 shaking 하고 하루 동안 방치
• Hexane층을 분획하고 물층에 다시 hexane 150mL을 넣고 30분간 shaking 하고 하루 동안 방치
• 위의 과정을 반복한 다음 3회 분획한 hexane층을 40℃ 항온수조에서감압 건조
• 감압 건조한 각각의 hexane층을 nitrogen gas로 잔류 hexane 제거
• 각각의 시료들을 isopropyl alcohol로 녹인 후 20mL volumetric flask에 넣어 표선까지 맞춘 후 원심분리 (13,500rpm/10분)
• 0.45um membrane filter로 여과한 후 HPLC 시료로 사용
• 시료의 조제농도 1g/mL
3. 식물 추출물의 TLC 시험 문의 드립니다.
시험방법은
원료의 고형물을 메탄올에 녹여 검액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다.
검액 10 μL를 박층크로마토그래프용 실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다.
다음에 아세트산에틸:n-헥산(100)혼합액 (2 ： 1)을 전개용매로 하여 약 10cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다.
여기에 자외선 (주파장 254 nm) 조사하면 검액은 0.66∼ 0.68 Rf 값에서 푸른색의 반점을 나타낸다.
위의 시험이 진행가능한지 문의드리며,
가능하다면, 견적 및 시험기간, 필요한 시료량 등에 대해서 문의드립니다.
감사합니다
이경희 드림.
